下一代測序技術(shù)（NGS）的快速發(fā)展，讓精準醫療、生命科學(xué)研究邁入全新維度。而在這背后，離不開(kāi)實(shí)驗室里那些“低調的硬核設備”。本期專(zhuān)刊，我們將帶您走進(jìn)NGS實(shí)驗全流程，揭開(kāi)核心儀器設備的神秘面紗——它們如何協(xié)同作戰，將樣本轉化為海量基因數據？

NGS實(shí)驗流程

01、樣品制備及提取

02、樣品質(zhì)檢

03、文庫構建

04、文庫質(zhì)檢定量

05、測序及驗證

01樣本制備提?。壕珳实摹捌鹋芫€(xiàn)”

組織研磨/均質(zhì)儀

充分研磨樣品，應用于對生物樣品的DNA提取實(shí)驗分析，確保樣品前處理的理想效果；

核酸提取儀

高效提取DNA/RNA，確保樣本純度與完整性。

關(guān)鍵指標：通量（單批次處理樣本數）、兼容性（血液、組織、FFPE等樣本類(lèi)型）

02文庫構建：從“原料”到“標準化產(chǎn)品”

片段化設備—超聲破碎儀

聲波能量將DNA剪切至特定長(cháng)度。

真空離心濃縮儀

高效去除樣品中的溶劑，同時(shí)保護樣品的生物活性和化學(xué)結構，確保文庫構建的質(zhì)量和效率。

自動(dòng)化建庫工作站

優(yōu)勢：減少人為誤差，實(shí)現末端修復、加接頭、PCR擴增等步驟的全流程自動(dòng)化。

適用場(chǎng)景：大規模臨床檢測或高通量研究項目。

PCR儀

核心任務(wù)：擴增文庫，增加測序信號強度。

選擇要點(diǎn)：溫控精度、升降溫速度（影響擴增效率）。

03測序儀：數據生產(chǎn)的“超級引擎”

主流測序平臺

Illumina ：通量王者，單次運行可產(chǎn)出6Tb數據，適合全基因組測序或大規模隊列研究。

MGI ：國產(chǎn)標桿，超高通量+低成本，強勢進(jìn)軍臨床市場(chǎng)。

04質(zhì)控與驗證：不容忽視的細節

質(zhì)檢（樣品質(zhì)檢/文庫質(zhì)檢）：

1、Qubit熒光定量?jì)x，確保核酸濃度符合建庫要求。

2、凝膠電泳：評估DNA片段的大小分布和質(zhì)量

數字PCR（ddPCR）

**定量文庫濃度，避免測序失??；以及對測序結果的驗證。

05其他設備，小身軀大能量

離心機、混勻儀、金屬浴、磁力架、移液器等；

NGS實(shí)驗的成功，既需要“高精尖”設備的加持，更離不開(kāi)對應用場(chǎng)景的精準匹配：

臨床診斷：優(yōu)先考慮自動(dòng)化、合規性。

科研探索：側重靈活性和技術(shù)前沿性。

成本敏感場(chǎng)景：關(guān)注國產(chǎn)替代。